Wie erweist man ein protein?

Vielleicht möchten Sie ein Protein für ein Wissenschaftsprojekt anordnen, oder Sie haben vielleicht über dasaturierte Lebensmittel gelesen und möchten wissen, wie das funktioniert. Denaturierung ist der Prozess, durch den ein Protein aufgrund von Handeln aus äußeren Kräften, einschließlich Wärme, Strahlung, Säuren und Lösungsmitteln, seine Form und Struktur verliert. Organische Lösungsmittel denaturen in der Form von Proteinen. Die genaue Art, wie Sie ein Protein anweilen, hängt von der jeweiligen, mit dem Sie zusammenarbeiten möchten, da sie alle unterschiedlichen Denaturiermittel auf verschiedenen Ebenen erfordern. Das meiste Protein kann jedoch denaturiert werden, wenn Sie wissen, was in der Umwelt des Proteins ändert.

Schritte

Methode 1 von 2:
Dasaturieren eines Proteins
  1. Bildtitel Denature A Protein Schritt 1
1. Wärme verwenden. Wärme ist eine der einfachsten Wege und die häufigsten Wege, um ein Protein zu entzünden. Wenn das fragliche Protein in Lebensmitteln anwesend ist, legt einfach das Essen auf die Proteine ​​ab. Viele Proteine ​​können denaturiert werden, indem sie auf eine Temperatur von oder über 100 ° C (212 ° F) ausgesetzt werden. Dies ermöglicht es den Proteinen, ihre Löslichkeit zu koagulieren und zu reduzieren.
  • Die Länge der Exposition hängt von dem ab, was Sie zur Hitze aussetzen. Ein Ei kann zum Beispiel in einer Pfanne auf mittlerer Wärme in fünf Minuten kochen, während ein Braten stundenlang dauern kann, um in einem Ofen zu kochen.
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    2. Alkohol anwenden. Alkohol unterbricht die Wasserstoffbrückenbindungen, die zwischen Amidgruppen einer Peptidbindung auftreten. Wenn ein Protein einer Alkohollösung ausgesetzt ist, bilden die Alkoholmoleküle neue Bindungen mit der Proteinkette. Verwenden Sie eine Lösung von 70% Alkohol, um die Zellwand der Bakterien durchbrechen und das Protein zu wecken.
  • Konzentrierte Alkohole können gefährlich sein, da beide brennbar und toxisch sind. Tragen Sie immer volle Sicherheitsausrüstung, einschließlich Handschuhe und Augenschutz, und griff in einer sicheren, temperaturgesteuerten Umgebung.
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    3. Ändern Sie den pH-Wert. Die innere Struktur eines Proteins kann aufgebrochen werden, wenn ihre Umgebung sehr sauer oder sehr alkalisch ist, da sie die ionischen Bindungen stören, die die Salzbrücken des Proteins zusammenhalten. Fügen Sie dem Protein eine Säure- oder Basenlösung hinzu. Die umgebende Umgebung sollte bei einem pH-Wert von über 10 oder weniger 4 liegen, um die Denaturierung zu fördern. Wenn Sie die Änderung mit Säure induzieren, sollte der pH-Wert zwischen 2 und 5 liegen.
  • Das Ändern des pH-Werts kann je nach pKa jeder funktionellen Gruppe in dieser Aminosäure ein Aminosäure ionisieren. Sie können auch die in der Aminosäure vorhandene Aminogruppe oder Carboxylgruppe ionisieren.
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    4. Versuchen Sie schwere Metallsalze. Schwermetalle können Bindungen im Protein stören, wodurch es seine Struktur verliert. Salze von Schwermetallen wie Quecksilber und Blei können verwendet werden, um verschiedene Proteine ​​zu entzünden. Solche Salze sind von den meisten chemischen Lieferanten erhältlich und sollten immer mit Vorsicht und ordnungsgemäßen Sicherheitsgeräten einschließlich Handschuhen und Augenschutz verwendet werden.
  • Schwermetalle können mit den funktionalen Seitenkettengruppen eines Proteins interagieren, um Komplexe zu bilden. Schwermetalle oxidieren auch die Aminosäure-Seitenketten des Proteins.
    • Methode 2 von 2:
    Renaturierende Proteine
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    1. Bestimmen Sie, ob ein Protein wiederfalten kann. Einige Formen der Denaturierung sind dauerhaft, während andere rückgängig gemacht werden können. Das Kochen eines Eis oder eines Fleisches, zum Beispiel kann nicht rückgängig gemacht werden, aber ein Protein, das einem hohen pH-Wert ausgesetzt wurde, kann in einer neutralen Umgebung wiedergewinnen.
    • Ob das Protein, ob das Protein nachzeichnen kann oder nicht, von seiner DNA abhängen. Die DNA hält die Informationen, die für das Protein benötigt werden, um in seinen nativen Zustand zurückzukehren.
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    2. Den Denaturierungsfaktor entfernen. Bringen Sie die Umwelt um das Protein an die Stase zurück und entfernen Sie das Denaturierungselement. Entfernen Sie die Säure oder die Basis, zum Beispiel, oder bringen Sie das Protein wieder an eine vernünftigere Temperatur.
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    3. Verwenden Sie ein Renaturierungskit. Viele Laborvorräte verkaufen Unternehmen Renaturationskits, mit denen Sie die besten Parameter screen können, um die Renaturierung zu fördern. Solche Kits können besonders hilfreich sein, wenn Sie Proteine ​​in einem Labor oder experimentellen Einrichtungen betrachten.

    • Tipps

    Ein denaturiertes Protein verliert seine in ihrem nativen Zustand offensichtliche Quarbereiche, Tertiär- und Sekundärstruktur, aber seine primäre Struktur bleibt jedoch.
  • Ein denaturiertes Protein verliert in einigen Fällen auch etwas von seiner Bioaktivität, wie bei Enzymen, verliert seine Funktionsfähigkeit. Beispielsweise können Substrate nicht mehr an Enzymen binden können, die denaturiert wurden.
  • Das denaturierte Protein kann seine Löslichkeit in einer Lösung verlieren.
  • Sie können auch Nukleinsäuren unter Verwendung von Labortechniken, um die Stränge zu trennen.
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